本发明属生物技术领域，涉及一种检测ADH2基因多态性的方法。本发明通过ADH2基因及其多态相关碱基序列特征分析，用碱基错配创造酶切位点原理设计引物，其中一条引物根据突变位点邻近序列设计，引入错配碱基，使引物3’端和单碱基突变的一种突变型在PCR扩增后形成一个酶切位点，然后用相应内切酶进行酶切鉴定。经实验验证引物设计合理，PCR扩增顺利，扩增DNA片段可被内切酶HhaI、HinP1I和BstUI及其同工酶识别其多态类型，BSTUI酶切后电泳图条带清晰，易于辨认，所用内切酶价格便宜，易获得，经测序验证，不同基因型序列特征与预期结果一致。经人群样本验证该方法稳定可靠。