本发明公开了一种小麦花药一步成苗培养方法，选取小麦花粉细胞发育至单核中期到单核晚期的小麦幼穗，低温(2℃～4℃)预处理2天；经预处理的小麦幼穗，经常规消毒后，剥取花药组织接种在一步成苗培养基上遮光培养；待培养的花药组织出现肉眼可见的愈伤组织时，置于1500Lx光照条件下培养一周后，将光照强度增加到3000Lx～4000Lx，连续培养两周，即可产生根、苗健壮的花粉植株。该方法减少了花粉愈伤组织诱导不定芽和不定根两个必须的技术操作环节，培养成本降低了近50％，培养天数缩短了40～50天，绿苗平均诱导率与多步成苗的绿苗平均诱导率相当，白苗率普遍降低10个百分点，且试管苗生长健壮、根系发达，根茎连接部位很少或无愈伤组织残留，试管苗移栽成活率高。