本发明提供了一种采用高效液相色谱测定主流烟气中七种有害酚各自含量的方法，该包括主流烟气的捕集、烟气样品的制备和高效液相色谱荧光检测，首先用偏最小二乘法处理不同混合浓度标样的高效液相色谱荧光检测器输出的荧光检测光谱数据，建立数学模型，然后将烟气样品的高效液相色谱荧光检测数据中的间-甲酚和对-甲酚的荧光检测光谱数据输入数学模型，分别获得间-甲酚和对-甲酚的浓度。本发明方法能同时分析卷烟主流烟气中七种有害酚类化合物，实现了间、对-甲酚混合物的化学计量学方法的测定，结果准确，过程简单、运算快速快，并且不需要添加任何仪器、设备和试剂。