本发明涉及一种选自包括产生同质琥珀酸的Mannheimia菌属、放线杆菌属和厌氧螺菌属所组成的组的突变微生物，以及使用这些突变微生物制备同质琥珀酸的方法，具体涉及在厌氧条件下产生高浓度琥珀酸同时很少产生或者不产生其他有机酸的突变微生物，所述突变微生物通过使编码乳酸脱氢酶(ldhA)的基因、编码磷酸转乙酰酶(pta)的基因和编码乙酸激酶(ackA)的基因断裂而不使编码丙酮酸甲酸裂解酶(pfl)的基因断裂而得到，还涉及使用这些突变微生物制备琥珀酸的方法。与现有的产琥珀酸菌株相比，本发明的突变微生物具有高生长率和琥珀酸产率同时很少产生或者不产生有机酸的能力。因此，本发明的突变微生物对于生产琥珀酸的工业应用来说是有用的。