发明授权

  • 专利标题: 一种重复模块基因拼接方法
  • 专利标题(英): Repeated module gene-splicing method
  • 申请号: CN201010139914.8
    申请日: 2010-04-06
  • 公开(公告)号: CN101805747B
    公开(公告)日: 2012-05-09
  • 发明人: 孟清李梦梦施长华
  • 申请人: 东华大学
  • 申请人地址: 上海市松江区松江新城人民北路2999号
  • 专利权人: 东华大学
  • 当前专利权人: 东华大学
  • 当前专利权人地址: 上海市松江区松江新城人民北路2999号
  • 代理机构: 上海泰能知识产权代理事务所
  • 代理商 黄志达; 谢文凯
  • 主分类号: C12N15/66
  • IPC分类号: C12N15/66
一种重复模块基因拼接方法
摘要:
本发明涉及一种重复模块基因拼接方法,包括:(1)利用两条PCR引物对目的基因进行扩增;(2)双酶切PCR产物和质粒pET-LIC,片段与载体相连接,转化感受态细胞后得到质粒pET-TS;(3)双酶切质粒pET-TS并回收质粒片段,然后与目的基因片段进行连接转化,得到质粒pET-TS2;(4)双酶切pET-TS2并回收质粒片段,然后与目的基因片段进行连接转化,得到质粒pET-TS3;(5)双酶切上述质粒及目的基因PCR产物,利用相同的方法将重复片段不断的插入。本发明对多个重复模块基因的重复拼接,且这些模块之间没有任何的酶切位点残基保留,真正实现重复模块之间的“无缝”连接,且此拼接具有方向性。
公开/授权文献
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