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发明授权
CN101988124B 巢式PCR法扩增EGFR基因外显子19片段的方法 失效 - 权利终止

  • 专利标题： 巢式PCR法扩增EGFR基因外显子19片段的方法
  • 专利标题（英）： Amplification method of fragments of epidermal growth factor receptor (EGFR) gene exon 19 by nested polymerase chain reaction (PCR) method
  • 申请号： CN201010271634.2
    申请日： 2010-09-03
  • 公开(公告)号： CN101988124B
    公开(公告)日： 2012-10-24
  • 发明人: 蔡燕燕 , 吴奇涵 , 顾海英
  • 申请人： 华东师范大学
  • 申请人地址： 上海市普陀区中山北路3663号
  • 专利权人： 华东师范大学
  • 当前专利权人： 华东师范大学
  • 当前专利权人地址： 上海市普陀区中山北路3663号
  • 代理机构： 上海伯瑞杰知识产权代理有限公司
  • 代理商 吴瑾谕
  • 主分类号： C12Q1/68
  • IPC分类号： C12Q1/68
巢式PCR法扩增EGFR基因外显子19片段的方法
摘要：
本发明涉及分子生物学领域，公开了一种用巢式PCR法扩增中EGFR基因外显子19片段的方法。步骤包括：（1）第一轮PCR扩增，以血浆DNA或石蜡切片DNA为模板，扩增25～35个循环，所用的引物为：C19F和C19R；（2）第二轮PCR扩增，以步骤（1）的第一轮PCR扩增产物为模板，扩增25～35个循环，所用的引物为：19F和19R。经过上述方法扩增所得到的DNA片段可满足测序的要求；扩增的产物经过序列分析，判断突变情况。本发明通过第一轮扩增，提高了含有目的片段的模板DNA浓度，可提高EGFR基因外显子19的扩增效率。
摘要（英）：

The invention relates to the field of molecular biology, and discloses an amplification method of fragments of epidermal growth factor receptor (EGFR) gene exon 19 by a nested polymerase chain reaction (PCR) method. The method comprises the following steps: (1) performing primary PCR amplification for 25-35 cycles by taking a plasma DNA or a paraffin section DNA as a template and utilizing the primers of C19F and C19R; and (2) performing secondary PCR amplification for 25-35 cycles by taking the product obtained in the primary PCR amplification as a template and utilizing the primers of 19F and 19R. The DNA fragments obtained by the above amplification method can meet the sequencing requirement, and the mutation condition of the amplification product is judged by sequence analysis. By the primary amplification, the DNA concentration of the template containing target fragments is improved, and the amplification efficiency of the EGFR gene exon 19 is enhanced.

公开/授权文献
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