本发明公开了以柑橘果渣为原料生产细菌纤维素的方法，属于微生物发酵生产技术领域。方法包括(1)柑橘果渣的预处理；(2)柑橘果渣预处理液的酵母发酵；(3)生产发酵培养液的配制；(4)细菌纤维素的生产与处理等步骤。本发明以柑橘果渣为原料，以自主选育的中间葡糖醋杆菌CIs26CGMCCNo.4663为发酵菌株，经两段式发酵工艺生产细菌纤维素的方法，产量高达13.5g/L，生产周期从常规的半个月左右缩短至5-10天，产品呈半透明，柔韧性好，且克服了原来以椰子汁为原料的单一局面。该方法可在细菌纤维素生产企业中推广应用。