本发明公开了一种总黄酮含量测定方法，具体是一种测定青天葵或青天葵提取物或与青天葵总黄酮相同的物质中总黄酮含量的方法。该方法系紫外可见分光光度法，用芦丁对照品配制成梯度标准溶液，青天葵药材或提取物配制成待测液，采用AlCl3-HAc-NaAc显色体系，在405nm波长下，测定梯度标准溶液吸光度，建立标准曲线。再测定待测液吸光度，从标准曲线查出待测液浓度，最后根据配制溶液时的稀释倍数计算出青天葵药材或提取物的总黄酮含量。与现有技术比较，本发明的优点是检测方法专属性、针对性强，结果准确可靠；精密度良好；稳定性良好；重复性好；准确度高。本发明可用于药材或提取物的质量控制。