本发明涉及一种离子交换层析法检测糖化血红蛋白浓度的糖化血红蛋白分析仪四梯度洗脱分析法。本发明的方法是：设置四种固定浓度的洗脱液，使其分别对吸附有待测样本的阳离子交换树脂进行洗脱，并对洗脱后的液体进行色谱分析，确定洗脱成份的含量，进而确定血糖浓度；所述的四种洗脱液分别为：A洗脱液，用于阳离子交换树脂清洗、平衡；B洗脱液，用于洗脱糖化血红蛋白其他亚组分HbA1a、HbA1b；C洗脱液，用于洗脱糖化血红蛋白HbA1c亚组分；D洗脱液:用于洗脱非糖化血红蛋白及再生阳离子交换树脂。本发明在准确检测糖化血红蛋浓度同时，可简化检测设备结构和检测程序、提高设备运行可靠性、降低设备成本，同时可减少洗脱液交叉污染。