本发明属于应用环境微生物和农业领域，涉及降解乐果、氯苯胺灵和敌稗的酰胺酶基因dimtH及其编码的蛋白质及其应用。本发明降解乐果、氯苯胺灵和敌稗的酰胺酶基因dimtH全长为1395bp，序列如SEQ ID NO.1所示，其编码产物酰胺酶DimtH含465个氨基酸，序列为SEQ ID NO.2。DimtH能降解杀虫剂乐果和除草剂氯苯胺灵、敌稗。酰胺酶基因dimtH可用于构建可降解杀虫剂乐果和除草剂氯苯胺灵、敌稗的转基因作物，也可用于土壤、水体中杀虫剂乐果和除草剂氯苯胺灵、敌稗的残留的去除及药物合成的生物转化，具有非常重要的理论和应用价值。