本发明涉及生物分析化学分析领域，具体涉及一种甲胎蛋白的均相时间分辨荧光分析方法，该方法由以下步骤组成：(a)定量标准曲线制备：将HFRFA能量受体、HFRFA能量供体和甲胎蛋白标准品一起孵育，进行均相时间分辨荧光检测和分析，得到甲胎蛋白浓度与荧光值的标准曲线；(b)样品检测：将HFRFA能量受体、HFRFA能量供体和待测甲胎蛋白样品一起孵育，进行均相时间分辨荧光检测和分析，将检测样品得到的荧光值与步骤(a)得到的标准曲线比较计算待测甲胎蛋白样品浓度。本发明所述的方法具有特异性强和检测灵敏度高的优点，在临床分子诊断和食品检测等生物化学分析中具有非常重要的意义。