本发明公开了一种广谱抗植物病毒的转基因植物的制备方法及应用，其步骤是：a.转化载体的构建：将苏云金芽孢杆菌的aiiA基因用限制性内切酶酶切后连接到植物双元转化载体pA8上，通过冻融法将连接好的植物双元转化载体pA8-aiiA转入农杆菌菌株EHA105中；b.植物遗传转化：通过叶盘转化方法分别转化珊硒烟草和本生烟草，在含有潮霉素的MS培养基上筛选获得转化苗，通过生根培养基获得完整的再生植物，包括转化空载体的pA8再生植物以及转化pA8-aiiA的再生植物。方法易行，操作简便，增强对不同植物病毒的广谱抗性，将可广泛应用于经济作物的病毒病防治。