一种高通量筛选细胞在三维基质中生长迁移行为的装置及方法，它涉及生物学领域，电动载物台的下方设置有物镜，电动载物台的上方设置有培养室平皿，培养室平皿内底部设置有载玻片，载玻片上覆盖有聚二甲基硅氧烷薄层，聚二甲基硅氧烷薄层上涂有细胞悬浮液层，细胞悬浮液层两侧设置有胶条，胶条上覆盖有盖玻片。它克服了现有二维研究无法提供细胞在三维状态生长及迁移等重要行为信息的不足，提供一种高通量三维筛选新装置及方法，不仅实时监测细胞在三维状态的各种行为，而且能高通量筛选不同基质、不同因子对细胞在三维状态的生长及迁移等重要行为的同时，方便、高效、高通量的筛选各类基质对细胞行为的影响，并且该装置价格低廉、结构简单。