本发明提供了一种高密度发酵过程中二氧化碳对微生物生长及代谢抑制作用测量方法，该测量方法利用发酵过程中微生物自身代谢产生的二氧化碳来测试二氧化碳对微生物生长及代谢抑制作用。测量方法通过比较参照发酵过程和测试发酵过程中发酵罐出口二氧化碳浓度、发酵罐内微生物细胞浓度、微生物代谢产物浓度的差异，得到高密度发酵过程中二氧化碳对微生物生长及代谢抑制作用的评估。该方法能有效地避免因人为地通入外界产生的二氧化碳而过高估计二氧化碳抑制作用，使整个测量过程更接近实际发酵过程、测量结果更可靠。