本发明公开了一种苏云金芽孢杆菌及制备方法和应用，保藏编号：CCTCC M2012040。其步骤是:A、利用土壤中苏云金芽孢杆菌芽孢耐78－82℃高温以及形成伴胞晶体的特性，采用弹土法分离苏云金芽孢杆菌；B、以初孵甜菜夜蛾和棉铃虫为试虫，进行毒力生物测定，经过比较毒力致死中量LC50，筛选到高毒力菌株BtCS36。利用正交试验和小试发酵，确定了其发酵培养基配方和发酵工艺。利用该菌和确定的发酵工艺发酵周期为30小时左右，发酵液对棉铃虫的毒力效价达3000-5000IU/μl。生产新型Bt杀虫剂不仅可以高效防治多种鳞翅目害虫，保证农作物稳产高产，而且对生态环境安全，因此具有重要的现实意义和紧迫性。