一种多菌种阶段式乙醇发酵方法，它涉及一种阶段式乙醇发酵方法。本发明要解决现有乙醇发酵过程中发酵强度不高，乙醇转化率低的问题。本发明方法为：一、将安琪酿酒酵母和南阳混合酵母菌种活化培养；二、将能源甜菜块根压榨汁与0.4%的五氯苯酚钠加入发酵罐中杀菌；三、将营养盐加至步骤二发酵液调pH至5.0；四、加入活化的安琪酿酒酵母，25~30°C反应5~10h，28~35°C发酵20~25h，再加入活化的南阳混合酵母，继续发酵20~25h，即完成反应。本发明首次采用多菌种阶段式新工艺技术，本发明的乙醇转化率为98.54%。较现有的采用游离酵母间歇发酵法的乙醇转化率提高了4.66%。本发明应用于乙醇发酵领域。