本发明涉及一种引起猪的多发性浆膜炎、关节炎、耳炎等的猪鼻支原体的巢式PCR检测方法，主要步骤包括：1）提取猪鼻支原体样品的DNA，低温保存备用；2）以一对特异性引物MhrP01、MhrP02对猪鼻支原体样品进行第一轮PCR扩增；3）以另一对特异性引物MhrP03、MhrP04对猪鼻支原体第一轮PCR产物进行第二轮PCR扩增；4）对扩增产物进行电泳检测。如果存在346bp的特异性条带，则确定所检测的病菌为猪鼻支原体。本方法在微量病原菌的存在下，都可以准确检出，只要有102CCU/mL病原菌存在，即可检测出。本发明的优点是检测速度快、特异性强、灵敏度高和易于推广。