本发明公开了属于作物抗病育种领域的一种玉米自交系弯孢菌叶斑病抗性的早期鉴定方法，包括将3叶期玉米自交系幼苗的叶片用玉米新月弯孢菌毒素溶液处里，然后用硼酸钠缓冲液混合提取叶片中的苯丙氨酸解氨酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶的酶粗提液；再分别测定苯丙氨酸解氨酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶的酶活，并计算比活力；再按照公式计算抗性值，接着计算抗性值的平均数，如果抗性值的平均数大于3，即为抗玉米弯孢菌叶斑病的自交系。本发明方法准确、可靠；其次，本发明方法可在室内完成鉴定和筛选，不受外界环境条件的限制；此外，本发明方法在苗期进行抗病性鉴定，不受季节限制，并且缩短了鉴定所需的时间；本发明方法工作效率高。