本发明公开了一种紫胶桐酸含量的测定方法，包括采用高效液相色谱法进行测定，以含有甲醇的水溶液为流动相，采用示差折光检测器进行测定，按照外标法以峰面积分别计算紫胶桐酸样品中的紫胶桐酸的含量。本发明方法提高了含量测定的精确性，缩短了测定时间，重复性好，适应性高，而且本发明方法的选择性强，灵敏度高，最低检测限小，克服了紫胶桐酸没有共轭结构，不能利用紫外(UV)检测器来检测的缺陷，降低了紫胶桐酸的生产、检测成本，适宜于紫胶桐酸的检测应用。