本发明公开了一种等温核酸扩增反应试剂，包含以下成分：Tris缓冲液、醋酸钾、醋酸镁、二硫苏糖醇、聚乙二醇、ATP、dNTPs、磷酸肌酸、肌酸激酶、引物组、SSB蛋白、大肠杆菌解旋酶RecQ蛋白、UvsY蛋白、UvsX蛋白和DNA聚合酶。本发明还公开了一种等温核酸扩增的方法，包括如下步骤：①提取DNA，或提取RNA后反转录得到cDNA；②加入上述核酸扩增反应试剂，25-45℃下反应10—60分钟，即可完成核酸的扩增。相比传统PCR技术，本技术几乎不需要专业仪器，操作更为简单，对操作人员的技术要求更低，而且反应时间仅需半小时左右。