本发明公开了一种烟草绿原酸的分离纯化方法，包括：提取烟草绿原酸初提液，在每毫升烟草绿原酸初提液加入活性炭25-100mg，室温搅拌吸附30min，用水分洗涤残留在材料表面未被吸附的杂质，然后，在50℃条件下，用60％乙醇或丙酮溶液洗脱绿原酸，将洗脱液浓缩后过大孔树脂进行吸附、洗涤、洗脱，干燥后获得绿原酸的液相色谱纯度大于60％，进一步精制，获得高纯绿原酸。本发明创新的利用活性炭对烟草绿原酸进行吸附，吸附率高达99％以上，解析率大于95％，成本低适合大规模生产；活性炭与大孔树脂联用，绿原酸损失少，回收率高，操作简单，节约溶剂，同时利用两者吸附的差异，将不同性质的杂质分离，生产纯度更高。