一种快速鉴别天花粉类药材的分子生物学方法
摘要:
本发明涉及一种鉴别天花粉及其类似品的分子鉴别新方法,在引物设计和退火温度2个关键的环节上实现了大胆的创新。引物设计在天花粉类药材已知的ITS上进行,长度为20bp左右,遵循一般引物的设计原则。同时,退火温度也根据多态性条带的多少进行筛选确定。天花粉的特征鉴别条带确定为560,960bp条带,1930,1400,839,715bp等条带可作为天花粉的辅助鉴别带。该发明具有如下优点:①简单易行。虽然在引物设计上稍增加了难度,但其特异性大大增加,设计2~3个引物即可得到理想的鉴别引物,避免了大量筛选随机引物的烦恼;②稳定性和重复性好。由于提高了引物的特异性和退火温度,扩增条带一般只有1~5条,正品不同产地和不同储存时间对PCR结果均没有影响;③提供的信息量大。能对正品及大部分伪品同时进行扩增,从而可以分别建立正品及伪品的标准电泳鉴别图谱以实现对正、伪品的准确鉴别。
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