本发明公开了一种沙门氏菌效应蛋白SopB的多克隆抗体的制备方法，旨在提供一种特异性好、灵敏度高、可与沙门氏菌感染宿主细胞的过程中分泌的内源性沙门氏菌效应蛋白SopB发生特异性结合的兔源多克隆抗体的制备方法。以沙门氏菌效应蛋白SopB全长氨基酸序列如SEQ？ID？NO:1所示的从N末端第29位至第168位共计139个氨基酸如SEQ？ID？NO:2所示的蛋白质序列为免疫原，采用常规多克隆抗体的制备方法制备抗血清；纯化抗血清，即得沙门氏菌效应蛋白SopB的多克隆抗体。本发明的方法得到了沙门氏菌效应蛋白SopB的多克隆抗体，有利于对沙门氏菌效应蛋白SopB的免疫印迹分析、免疫荧光染色激光共聚焦显微观察，以及人们对肠道致病菌感染机制的深入研究。