本发明属于食用菌栽培技术领域，具体涉及一种双孢菇培养基质用预发酵鸡粪及其制备方法。本发明的双孢菇培养基质用预发酵鸡粪，其特征在于，由以下重量百分比的原料制成：干鸡粪75-83%、干稻壳8-12%、石膏粉4-8%、过磷酸钙1.5-2.5%、石灰2.5-3.5%。使用预发酵后的鸡粪为原料制备的双孢菇培养基质培养双孢菇，比直接使用干鸡粪为原料制备的双孢菇培养基质培养双孢菇，每平方米多产1.3公斤的鲜菇，且病虫害明显减少，单体菇重量增加、菇型圆整度好、易管理，易采摘，出菇潮次明显。