本发明涉及一种冬虫夏草菌丝体发酵物及其应用，可以用于增强免疫力和抗疲劳产品的制备。是通过将野生冬虫夏草Cordycepssinensis(Berk.)Sacc.子实体通过菌种采集、保藏与复壮,母种、一级种和二级生产种的制作,成品冬虫夏草菌丝体的制备及其有效成份的提取等步骤制备得到本发明的冬虫夏草菌丝体。本发明制备冬虫夏草菌丝体的方法具有工艺简单,环保,无废液排放,成本低廉等特点,因此具有广泛的实用性和可操作性。经实验证明由本发明方法制备的冬虫夏草菌丝体的有效成份能显著延长小鼠负重游泳时间,因此具有良好的增强免疫力和抗疲劳作用,可用于制备增强免疫力和抗疲劳产品。