本发明公开了一种番茄环纹斑点病毒RT-LAMP检测方法、引物组及其应用，发明人采用环介导等温扩增（LAMP）技术，并根据番茄环纹斑点病毒L片段的基因序列设计了相应的RT-LAMP检测引物组，包括外侧引物对F3和B3、内侧引物对FIP和BIP，由此发明了用于检测番茄环纹斑点病毒的RT-LAMP检测方法及试剂盒。应用本发明的检测方法及试剂盒，仅需通过对烟草、辣椒、番茄及杂草等疑似感染植株样品进行总RNA提取并进行环介导等温扩增，即可快速检测出是否感染番茄环纹斑点病毒，方便基层快速、准确、简便地进行病害鉴定，进而采取适当的防治措施，减少病害带来的损失。