本发明公开了一种壳聚糖与甘氨酸-L-半胱氨酸-高牛磺酸三肽组合物及其制备方法和应用，其制备方法为：配制0.01wt%-20wt%的甘氨酸-L-半胱氨酸-高牛磺酸三肽的水溶液；配制壳聚糖凝胶：含0.01-10wt%羧甲基壳聚糖，搅拌充分溶胀成凝胶，加入甘氨酸-L-半胱氨酸-高牛磺酸三肽的水溶液，搅拌均匀，得到壳聚糖与甘氨酸-L-半胱氨酸-高牛磺酸三肽组合物凝胶；采用该方法制备的组合物，具备了比两者单独使用更好的抗放射性皮炎及促创口愈合的作用。