本发明公开一种快速鉴定滇重楼皂甙组成的检测方法及其应用，采用四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱检测、并通过对已知重楼皂甙的质谱裂解规律的分析，二级质谱碎片采用高能碰撞诱导解离(HCD)方式获得，较常规的碰撞诱导解离CID能获得更多的低质量端碎片，对化合物的结构解析十分有用，建立了采用高分辨质谱仪对未知的滇重楼皂甙组成进行快速研究鉴定的技术方法，采用液相高分辩质谱联机检测鉴定技术对滇重楼中未知甾体皂甙组成进行分析鉴定，共鉴定发现了滇重楼含有17种重楼皂甙、其中发现的3种新甾体皂甙还未有报道、5种为新发现的重楼皂甙组分。