本发明公开了一种测定卷烟主流烟气中苯并[a]芘含量的方法，包括内标溶液的制备、标准工作溶液的制备、样品溶液的制备、气相色谱-串联质谱分析和标准工作曲线的绘制及样品结果的计算。该方法首次采用样品萃取液直接进样，气相色谱-串联质谱法测定卷烟主流烟气中苯并[a]芘的含量。样品前处理简捷实用，避免现行检测方法中样品净化、浓缩等处理过程，大为简化了处理过程，减少了有机溶剂、耗材的使用；利用内标法定量，可以不用定容，且可以减少由前处理方法重现性和仪器精密度问题带来的误差；选择峰形和分离效果最好的HP-5MS柱为分离柱，并采用能同时给出定性和定量信息的GC-MS/MS（MRM）作为检测模式，提高了响应信号的灵敏度，保证了分析结果的准确性。