本发明涉及生物检测技术领域，具体涉及一种利用双重荧光PCR法对甲型和乙型流感病毒在单管联合进行检测的引物、探针及试剂盒。本发明的针对甲型和乙型流感病毒的双重荧光PCR检测用引物及探针，其核苷酸序列如SEQIDNO：1-6所示；本发明的甲型和乙型流感病毒联合检测的双重PCR试剂盒，包括甲乙型流感病毒检测混合液，所述甲乙型流感病毒检测混合液中含有前述的引物和探针。利用本发明的试剂盒和引物探针能快速检测甲型和乙型流感病毒，具有操作简便、灵敏度高、特异性好等优点；可及时发现和确诊可疑病例，提高对该类疾病的监测水平。