本发明公开了一种高纯度7S大豆球蛋白的制备方法及其应用。本发明公开的一种7S大豆球蛋白的制备方法，包括如下步骤：（1）将脱脂大豆粉用酸沉法得蛋白粗提液；（2）将（1）的粗提液进行强阴离子交换层析进行分离纯化，收集目的洗脱液1；（3）将目的洗脱液1进行陶瓷羟基磷灰石层析分离纯化，收集目的洗脱液2，即为目的蛋白；所述目的蛋白为沉降系数为7S的大豆球蛋白。本发明公开的方法工艺简单，易于流水线分离纯化，便于7S大豆球蛋白的工业化生产。