本发明公开了一种促进马尾松组培继代芽生根方法，选用生长健壮、半木质化及苗高2-3cm的马尾松组培继代芽，采用不同的培养基以两步生根法，先接种在含有吲哚乙酸、吲哚丁酸、蔗糖的1/2改良MS培养基Ⅳ中，诱导处理不定根原基21-28d；然后转接至没有生长素，而是含有活性炭或抗坏血酸、蔗糖的1/2改良MS培养基Ⅴ中，促进不定根的表达与伸长；将已生根的再生植株移栽于黄泥土或泥炭土、蛭石、珍珠岩混合基质中培育极大地促进和改善了继代芽生根情况，马尾松继代芽生根率达93.1%以上，最高生根率达97.6%，且根系质量较高，移栽成活率达85.1%以上，最高成活率达93.0%，具有较好的经济效益和社会效益。