本发明涉及一种用于甲型流感病毒一步反转录定量PCR检测方法的引物、探针及试剂盒。所述引物序列如SEQ ID NO.1和2所示，所述探针为SEQ ID NO.3和4。采用上述引物和探针可通过一步法FRET-PCR技术对甲型流感病毒进行检测。多数现有的检测流感病毒的技术为二步法，包括以随机引物介导的反转录（第一步）和随后的PCR（第二步）。此法使用随机引物，会产生大量的背景核酸，降低反转录效率，同时产生的背景核酸会降低PCR的效率。一步法基于特异引物的反转录系统，效率高，易操作，减少污染机会，从而极大提高了PCR的扩增效率。