一种液相色谱串联质谱方法在大规模吸烟人群样本生物监测3-2-羟乙基腺嘌呤的应用，包括以下具体过程：1）取样，采集志愿者尿液，2）逐一对志愿者尿液进行处理、测定，得到每一个志愿者尿液样品中3-2-羟乙基腺嘌呤的含量；3）将每一志愿者尿液样品的测定数据输入数据分析软件进行分析处理，找出吸烟者尿液中3-2-羟乙基腺嘌呤的含量规律。本发明采用氘代标准品作为内标定量分析物可以减少样品前处理过程中引起的误差、串联质谱法更好的提高了方法的选择性与准确性和灵敏度。通过色谱柱以及洗脱条件的选择与优化，较好的提高了色谱分离过程，缩短了色谱分析的时间，减少了有机溶剂的消耗量，并使用Excel和SPSS软件对结果进行了统计学分析。