本发明公开了一种用于术前手术室消毒的喷雾剂及制备方法和使用方法，属中药领域；本发明喷雾剂有效成分的原料组成为：鹰不扑、菟丝、萱草、透骨香、小飞蓬、薜荔、乌豆根、芜荑、瓦草、五倍子、藤黄、昙花、西洋蓍草、一串红、仙茅和薏苡根；本发明喷雾剂所选药材配伍相宜，符合中医药学和现代医药学理论，能够迅速杀灭病毒、细菌、真菌及芽孢等，降低手术感染的发生，有效防止手术室内感染对患者造成的危害，提高手术的安全性；此外，还可用于各种器具及环境消毒，对人体无不良影响，使用简单，价格便宜，效果显著，避免了细菌在空气中传播，适合在手术室内广泛应用。