本发明属于纳米结构的荧光化学传感器领域，特别涉及基于硅纳米线的碱性磷酸酶荧光化学传感器及其制备方法，以及该荧光化学传感器的应用。所述的碱性磷酸酶荧光化学传感器是表面修饰有对碱性磷酸酶具有选择性荧光响应的磷酸化荧光素分子的硅纳米线或硅纳米线阵列荧光化学传感器。所述的基于硅纳米线的碱性磷酸酶荧光化学传感器可用于含有碱性磷酸酶分子的溶液体系中的碱性磷酸酶分子的检测；从硅纳米线阵列上刮下来的单根硅纳米线的荧光化学传感器，在单细胞水平上碱性磷酸酶分子的检测上有广泛的应用前景，为直接检测细胞内碱性磷酸酶的活性提供了一种新的传感器。