禽多杀性巴氏杆菌病菊粉果胶灭活疫苗的制备方法，属于疫苗领域；首先制备禽多杀性巴氏杆菌菌悬液，加入甲醛，加入量为禽多杀性巴氏杆菌菌悬液体积的0.2-0.25%，6-37℃条件下静置20-22小时完成禽多杀性巴氏杆菌菌悬液的灭活；取菊粉加入到灭活后的菌悬液中，加入量与菌悬液的质量比为0.9-1:1；混合均匀后再向其中加入所得混合物体积3%的果胶，混合均匀后室温放置至果胶完全溶解，再向其中加入所得混合物体积0.009-0.01%的硫柳汞，再次混合均匀后即为禽多杀性巴氏杆菌病菊粉果胶灭活疫苗。本发明针对禽类多发性禽多杀性巴氏杆菌病设计，所制备的灭活疫苗对禽类多发性禽多杀性巴氏杆菌病具有较好的免疫预防效果，保护率达到90%以上，安全性好，无不良反应。