一种食用菌净化接种正压节能系统，包括一级净化系统、二级净化系统和三级净化系统；一级净化系统包括用于抽取地下水的水泵I、用于盛放水泵I抽取的地下水的水池、用于从水池中抽水的水泵II、用于对一级净化室降温的湿帘、高温抽风机和低温抽风机；水池中安装有水位传感器，一级净化室内安装有温度传感器I；二级净化系统包括制冷机、安装于二级净化室内的温度传感器II；二级净化室的墙体开设有排风口和连通三级净化室的传送进/排风口；三级净化系统包括安装于三级净化室顶部的高效无菌净化器和无菌循环净化恒温器；三级净化室的墙体开设有连通净化通道的传送排风口。采用本发明，可实现食用菌工厂化净化接种节约电能60%以上。