一种光学纯R-乙偶姻的生产方法，包括如下步骤：将(R,R)-2,3-丁二醇脱氢酶基因(bdh)和葡萄糖脱氢酶基因(gdh)在大肠杆菌中共表达，并以此重组大肠杆菌休止细胞为生物催化剂，以丁二酮为前体转化生产光学纯R-乙偶姻。葡萄糖脱氢酶能够提供(R,R)-2,3-丁二醇脱氢酶所需的辅酶NADH，而(R,R)-2,3-丁二醇脱氢酶在NADH存在的条件下具有催化丁二酮生成光学纯R-乙偶姻的特性，R-乙偶姻的产量可达26g/L，光学纯度为99.6％。本发明的方法培养基简单，操作过程简便，产物分离方便，不需要复杂的手性拆分步骤，并且实现胞内辅酶的再生，成本低，极具工业应用前景。