本发明公开了来自罗丹明B、二亚乙基三胺和异硫氰酸苯酯的荧光探针及其制备方法和应用。具体而言，本发明首先使罗丹明B与二亚乙基三胺反应以形成性质稳定的螺环酰胺结构并引入含氮桥联片段，再与异硫氰酸苯酯反应以引入硫原子。利用汞离子的亲硫性，通过上述方案获得的新型罗丹明B-苯基硫脲衍生物（即汞离子荧光探针RDTU）的每一个分子能够结合两个汞离子，因而具备较高的选择性和检测灵敏度。该荧光探针分子可以在中性缓冲溶液，特别是水相中进行检测。另外，该荧光探针分子还可以检测来自氯化汞的汞离子，具有更好的实用性。