本发明提供一种脱氢酶电极及其制备方法。该电极包括基底电极、涂敷于所述基底电极上的电子传导层和涂敷于所述电子传导层上的脱氢酶层，所述电子传导层为仿生纳米复合材料；所述脱氢酶层为仿生纳米复合材料/脱氢酶复合物。其制备方法包括：a、将碳纳米材料和生物大分子超声分散的悬浊液滴涂于基底电极上形成电子传导层；b、将脱氢酶加入上述悬浊液超声处理得到固定化脱氢酶体系滴涂于上述电子传导层上形成脱氢酶层。该脱氢酶电极能在低电位下实现辅酶的电化学再生，操作简单、检测灵敏度高、电极稳定性重现性好、酶活损失小。