本发明公开了一种利用重组大肠杆菌厌氧发酵生产5‑氨基乙酰丙酸的方法，是将重组大肠杆菌接种于AM1‑酵母粉无机盐培养基中，先在好氧条件下培养8～15h生长菌体，然后转厌氧发酵，发酵时间为72±10h。本发明方法无需添加昂贵的琥珀酸前体即可通过厌氧发酵生产5‑氨基乙酰丙酸，且生产的5‑ALA不易被降解，简化了工艺，降低了成本。实验证实在厌氧发酵条件下本发明5‑ALA的产量最高达1.65g/l，5‑ALA/葡萄糖转化率为0.32g/g，提示具有很好的工业开发和应用前景。