本发明公开了一种以山梨醇作为碳源提高发酵生产莽草酸产量的方法。其公开了一种生产莽草酸的发酵培养基，该培养基包括碳源，所述的碳源为0.1～5%山梨醇，所述的百分比为每100毫升发酵培养基中所含有的山梨醇的克数。本发明的用于生产莽草酸的发酵培养基中以山梨醇作为碳源，其显著提高了菌株发酵生产莽草酸的产量，其产量较传统的以葡萄糖作为碳源提高至750%。本发明的工艺简单有效，原料价格低廉，可应用于生物合成莽草酸的产业化生产中，且对其它的以大肠杆菌发酵生产代谢产物的过程优化具有积极的指导作用。