本发明涉及基因检测领域，具体涉及一种遗传性耳聋基因检测的核酸膜条及试剂盒。所述核酸膜条包括一基底和固定于所述基底上的特异性寡核苷酸探针，所述特异性寡核苷酸探针序列如：SEQ ID NO：1?42。本发明的另一技术方案为提供一种遗传性耳聋基因检测的试剂盒，所述试剂盒包括上述的遗传性耳聋基因检测试剂盒检测的核酸膜条、PCR反应液I和PCR反应液II。本发明有益效果在于：本发明遗传性耳聋基因检测的核酸膜条及试剂盒包括8对能够高效特异扩增的引物和42条能特异杂交的探针。本发明检测位点较全，做到了2管反应液1张膜条就能够同时完成21个常见的耳聋位点的检测。