本发明公开了一种用于复杂基质中多农药残留分析的层析柱及其应用方法，属于农药残留监测领域。本发明首先公开了一种用于复杂基质中多农药残留分析的层析柱，包括层析柱管和填料，其中所述填料包括以下各组分：无水硫酸钠，石墨化碳和硅酸镁。本发明进一步公开了应用所述层析柱进行复杂基质中多农药残留分析的方法，包括以下步骤：(1)用淋洗液预淋洗层析柱；样液；(3)将上样液加到步骤(1)处理的层析柱中；(4)用洗脱溶剂洗脱，收集洗脱液，即得。本发明层析柱的净化效果好，目标化合物的色谱峰清晰可辨，样品回收率高；操作方法简便、快速。(2)在待净化样品中加入洗脱溶剂溶解，制备上