本发明公开一种松毛虫质型多角体病毒油剂及其制备方法和应用。该松毛虫质型多角体病毒油剂通过浸泡、切碎、洗脱过滤、离心分离、真空干燥、混配、分装制得。真空干燥机是在28‑35℃，负0.9个大气压下，真空干燥10‑15小时得到松毛虫质型多角体病毒浓缩液，除去了该油剂的恶臭异味，使该产品易于推广应用。所述混配是加入皂化甘油及分析纯活性炭。制成的油剂中松毛虫质型多角体病毒的含量为15亿PIB/ml以上，其病毒的致病力强，延长了油剂的保质期，可保质3‑4年。使用本发明油剂可使松毛虫病毒感病率达到95％以上，防治一次，在之后多年都对林间松毛虫有持续控制效果，持续防治效果可达5年以上。