本发明公开了一种吲哚菁绿-利妥昔单抗在制备乳腺癌前哨淋巴结示踪剂的应用，通过吲哚菁绿-利妥昔单抗偶联的特异性示踪剂进行前哨淋巴结活检时，由于特异性示踪剂仅使前哨淋巴结荧光显像而无次级淋巴结显像，因此进行活检时不必再循荧光显像的淋巴管找寻前哨淋巴结，只需术中用红外线荧光显像系统探测荧光显像的前哨淋巴结的位置，将前哨淋巴结周围组织解剖游离后，直接解剖检出荧光显像定位的前哨淋巴结，从而避免了前哨淋巴结的漏检和周围组织荧光显像污染的情况。