本发明公开了一种简易、高通量微流控化学发光纸芯片的制备及应用。采用全打印模式，在一张B5大小的普通滤纸上，批量打印出多个微流控化学发光纸芯片。打印过程包括：批量打印疏水蜡图案；熔蜡成型；批量打印化学发光试剂墨图案；批量打印氧化酶墨图案；批量打印流速调节疏水蜡图案；微流控化学发光纸芯片的激光切割；将制备的微流控化学发光纸芯片进行塑封处理。一种微流控化学发光纸芯片的现场检测的方法，包括如下步骤：将塑封的微流控化学发光纸芯片放入掌上发光检测仪的暗盒中；将样品溶液滴加到进样区内；然后盖上暗盒盖，开始检测。通过依次出现的32个化学发光峰值的大小来依次判断检测的32种组分是否存在及含量。