本发明公开了一种从烟草花蕾中提取游离氨基酸的方法，用PEG聚合物和无机盐的水溶液配制成PEG聚合物质量分数20％～30％、无机盐质量分数15％～25％的双水相萃取液，然后结合闪式提取器提取烟草花蕾中的游离氨基酸，提取液虹吸分离后真空浓缩，在用盐酸处理过的强酸性阳离子交换树脂纯化后真空浓缩至干，得到氨基酸纯品。本发明从烟草花蕾中提取游离氨基酸，效率高，方法简单，试剂成本低；本发明采用闪式提取结合双水相萃取技术提取分离烟草花蕾中的游离氨基酸，较传统方法，闪式萃取不需要多次提取过程，使用溶剂较少，节省时间，双水相萃取技术较单一的溶剂提取效果更好，所得氨基酸纯度通常为96％左右。