本发明涉及一种胶基型嚼烟中烟碱含量的测定方法，其包括以下步骤：(1)将胶基型嚼烟样品用碱液和不能与所述碱液互溶的有机溶剂的混合物进行萃取，得到含有烟碱的粗萃取液；(2)将所述含有烟碱的粗萃取液静置分层，收集含有烟碱的有机相层；(3)将得到的所述含有烟碱的有机相层用有机相膜过滤，得到含有烟碱的萃取液；(4)将所述含有烟碱的萃取液用气相色谱仪或气相色谱-质谱联用仪进行检测，采用内标法得到所述胶基型嚼烟中的烟碱含量。本发明的测定方法烟碱含量测定准确并且方法简单、便于操作，有推广的价值。